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光泵半導(dǎo)體激光(OPSL)技術(shù) ——流式細胞儀、測序儀的關(guān)鍵技術(shù)

日期:2020-11-18
瀏覽量:2354

光泵半導(dǎo)體激光(OPSL)技術(shù) ——流式細胞儀、測序儀的關(guān)鍵技術(shù)



需要用“激光“作為關(guān)鍵器件的您,一定不要錯過OPSL,因為它廣譜的波長特點,會讓您的設(shè)備升級到PLUS的高端“智”造。


做為世界頂級的光泵半導(dǎo)體激光(OPSL)提供商之一,Coherent已經(jīng)將技術(shù)完美的融合在了商品中。


一、OPSL具有的特點:


OPSL擁有:①波長可靈活擴展、②功率可調(diào)、③體積小巧、④高度可靠、⑤高光電轉(zhuǎn)換效率、⑥噪聲低、⑦光束質(zhì)量優(yōu)異、⑧直接數(shù)字調(diào)制、⑨光纖耦合選項等特點,其緊湊型結(jié)構(gòu)、智能化即插即用的配置,使其易于集成。這些特點都使其可以完美地適用于流式細胞儀和 DNA 測序儀。


二、適用于模塊組合,讓儀器真正“智”能組合


儀器制造商通過成本效益較高的臺式儀器來支持這些多元化的應(yīng)用。這類臺式儀器具有通用型平臺與模塊化結(jié)構(gòu),可輕松實現(xiàn)工廠定制。這種模塊化結(jié)構(gòu)通常包括多達 4 種不同的激光器、十幾個(熒光和散射)檢測通道以及多種輸入模式,例如,用于藥物研發(fā)的微孔板和用于血液分析的常規(guī)流管。

事實證明

基于 OPSL 技術(shù)的即插即用緊湊型激光模塊(如 Coherent OBIS 系列)在該領(lǐng)域備受青睞,因為這些模塊不僅便于工廠定制,也易于儀器升級和現(xiàn)場服務(wù)。這是因為不論波長如何,每個裝置都具備相同的光學(xué)、機械和電子特性。


三、OPSL波長幾乎覆蓋全光譜范圍,滿足流式細胞儀在科研和臨床的應(yīng)用

流式細胞儀是對包括血細胞在內(nèi)的小顆粒物進行探索、分析、計數(shù)和分類的卓越工具。細胞計數(shù)技術(shù)的主要應(yīng)用領(lǐng)域是臨床血液學(xué)/免疫學(xué),當(dāng)前較為新型的應(yīng)用領(lǐng)域包括生物燃料研究、流行病學(xué)(例如 COVID-19)、腫瘤學(xué)、干細胞研究和制藥(支持藥物研發(fā)的快速高通量篩選)。在臨床科學(xué)研究中,流式細胞儀采用的激光波長的數(shù)量也是目前人們關(guān)注的焦點。

由于OPSL技術(shù)具有波長可靈活擴展能夠靈活的匹配應(yīng)用所需的波長,覆蓋405 nm、488 nm、561 nm和 637 nm最常用的波長,這些波長拓展了流式細胞儀多參數(shù)測量的能力,解決了臨床檢測參數(shù)的問題,更適用于血液學(xué)等多指標(biāo)檢測項目。從而為這兩種應(yīng)用趨勢提供了極好的支持。

溫馨提示:

除 OPSL 技術(shù)外,Coherent 相干公司使用一些其他技術(shù)在 OBIS系列中,包括激光二極管和倍頻鐠 (Pr) 技術(shù)。這使得 OBIS系列激光器現(xiàn)擁有約 25 種不同的波長,包括 349 ?nm、355 nm、360 nm和 375 nm四種紫外波長。

圖 1. 在眾多流式細胞儀內(nèi),多條聚焦激光橫穿流動池。照片由 Thermo Fisher Scientific 提供。


此外,OPSL 技術(shù)的數(shù)字調(diào)制功能省去了部署外置調(diào)制器的成本和復(fù)雜性,支持流式細胞中的時序,實現(xiàn)多波長激光激發(fā)和檢測。同樣重要的是,對于從研究到臨床的終端用戶而言,OPSL的低噪聲和出色的指向穩(wěn)定性,能夠滿足他們對靈敏度和速度的需求,這樣的產(chǎn)品在臨床應(yīng)用中,可以節(jié)省臨床檢測時間,并且減少假陰性。


儀器制造商還希望通過使用新型熒光染料來提高多參數(shù)儀器的性能。在較大型的研究儀器中,他們將激發(fā)波長拓展到紫外光。使用紫外光激發(fā)擴大了多色分析/采集的帶寬,并且避免了使用熒光探針對樣品進行化學(xué)干預(yù)。這是因為所有活細胞都含有經(jīng)紫外光照射后便會自然發(fā)出熒光的物質(zhì)(例如 NADH、DNA)。舉例來說,精子可以通過內(nèi)源性 DNA 熒光物質(zhì)的數(shù)量來區(qū)分性別。


四、OPSL波長和功率的擴展能力提升測序儀的速度及精準(zhǔn)度



測序速度取決于能否高效激發(fā)它們。充分提高儀器效率意味著讓激發(fā)波長去匹配每個標(biāo)記的最大吸收光譜,而不是嘗試反向匹配。


測序的精準(zhǔn)度取決于能否區(qū)分四種熒光染料區(qū)分DNA 核苷酸 ACGT 中的一種。

幾乎所有用于DNA測序的儀器都依賴于以激光激發(fā)分別針對四種核苷酸?(ACGT)?化學(xué)標(biāo)記的熒光,所以集成合適波長激光器的儀器可以更高效、更準(zhǔn)確地進行DNA測序。

OPSL 技術(shù)具有靈活的功率擴展性,使激光器的功率范圍可以從幾毫瓦擴展到幾十瓦,這種高功率的儀器可以大幅提高DNA 測序的速度,同時大幅降低相應(yīng)的檢測成本。


第一次人類基因組的讀取工作由多個實驗室共同完成,每個實驗室運行多臺測序儀,歷時10余年,投入的總成本約為50億美元。如今,某些測序儀只需一個下午就能解讀一個完整的人類基因組,總成本大約在100至1000美元之間。儀器自動化和大規(guī)模并行的創(chuàng)新型技術(shù)成就了這種巨變。新一代測序儀可同時分析多達數(shù)十萬條DNA鏈。目前使用中的方法有數(shù)種,但是所有常用方法均基于熒光探針和標(biāo)記物的激光激發(fā)。

圖 2. 基于激光的熒光激發(fā)是新一代測序儀和第 3 代測序技術(shù)中的主要檢測方法,這種方法通過發(fā)射波長指示添加或減少的特定堿基,如這張原始數(shù)據(jù)軌跡圖所示。圖片由 Pacific BioSciences 提供。

溫馨提示:

某些方法對單鏈進行測序,其固有的信號強度低,在這種情況下,更高的激光功率極其必要,尤其是那些常常進行大規(guī)模并行測序的應(yīng)用。與之相對,為了避免造成損失,某些方法僅使用毫瓦級功率。OBIS 激光器的技術(shù)多樣性極具優(yōu)勢。

總結(jié):

連續(xù)激光器在生命科學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用多種多樣,每種應(yīng)用都有著對特定激光器的需求。事實證明,OPSL 技術(shù)獨特的波長和 功率可擴展的特點可以很好地應(yīng)對這一挑戰(zhàn),因此在市場上大獲成功。


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