對(duì)于有微生物檢驗(yàn)要求的醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)，尤其是高風(fēng)險(xiǎn)醫(yī)療器械（包括無菌醫(yī)療器械、植入性醫(yī)療器械）生產(chǎn)企業(yè)而言，微生物學(xué)檢驗(yàn)是其產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)判斷中的重要指標(biāo)。
開展醫(yī)療器械GMP檢查，有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)醫(yī)療器械生產(chǎn)過程中的合規(guī)性問題，降低后續(xù)風(fēng)險(xiǎn)。借鑒藥品GMP的成功經(jīng)驗(yàn)，醫(yī)療器械GMP在無菌室、微生物限度實(shí)驗(yàn)室、陽性對(duì)照室的設(shè)置和布局要求，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)方面大量引用了藥品GMP的指導(dǎo)理念。
01、微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室組成及功能
對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)來說，需進(jìn)行微生物檢驗(yàn)的情況包括以下四種：廠房或檢驗(yàn)室有潔凈度要求；生產(chǎn)工藝中使用純化水或注射用水；在非無菌產(chǎn)品出廠前對(duì)其初始污染菌控制水平有要求；無菌產(chǎn)品出廠前需進(jìn)行無菌檢驗(yàn)。
生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)根據(jù)不同檢查對(duì)象，選擇適宜且符合標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法及相應(yīng)判定指標(biāo)。
典型的微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室由無菌室、微生物限度室及陽性對(duì)照室三部分組成，三部分各有分工。
無菌室
無菌室是用來檢驗(yàn)無菌醫(yī)療器械及其原料、輔料是否無菌的場(chǎng)所。檢驗(yàn)供試品是否被細(xì)菌和真菌污染，須在環(huán)境潔凈度萬級(jí)以下、局部潔凈度百級(jí)的單向?qū)恿骺諝鈪^(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行，檢驗(yàn)全過程須嚴(yán)格遵循無菌操作要求，防止微生物污染。
微生物限度室
微生物限度室被用于終端滅菌醫(yī)療器械滅菌前的初始污染菌、產(chǎn)品初包裝的初始污染菌、潔凈區(qū)環(huán)境和工藝用水的微生物檢測(cè)，以及無菌過濾器的驗(yàn)證、環(huán)境及設(shè)備消毒效果的驗(yàn)證、滅菌效果的驗(yàn)證等。
陽性對(duì)照室
陽性對(duì)照室被用于無菌試驗(yàn)所需的陽性對(duì)照菌種及菌懸液的制備，培養(yǎng)基的適用性檢查，以及方法適用性試驗(yàn)所需的標(biāo)準(zhǔn)菌懸液的制備。陽性對(duì)照室中的操作多為有菌操作，對(duì)操作人員及操作環(huán)境造成污染的可能性大。因此，陽性對(duì)照室必須具有獨(dú)立的空調(diào)系統(tǒng)，且應(yīng)達(dá)到環(huán)境潔凈度萬級(jí)以下、局部潔凈度百級(jí)的要求，室內(nèi)空氣經(jīng)空氣過濾裝置處理后直接排向室外。
02、微生物檢驗(yàn)中的常見不符合項(xiàng)
筆者通過匯總2015~2018年自身參與及各地藥監(jiān)部門公開的對(duì)60余家高風(fēng)險(xiǎn)醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)的GMP檢查結(jié)果，調(diào)取其中與微生物檢驗(yàn)有關(guān)的不符合項(xiàng)，并依據(jù)國家藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的指導(dǎo)原則及部分法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)不符合項(xiàng)按特征類型進(jìn)行歸類，總結(jié)出人員、潔凈區(qū)壓差、文件記錄、設(shè)施設(shè)備、計(jì)量校驗(yàn)、初始污染菌控制、法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)符合性及物料標(biāo)識(shí)8個(gè)方面的共性缺陷項(xiàng)類型。
人員方面
相關(guān)質(zhì)檢人員未定期接受衛(wèi)生和微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)、潔凈作業(yè)相關(guān)培訓(xùn)。
新入職的檢驗(yàn)員在未接受與其崗位要求相適應(yīng)培訓(xùn)的情況下即上崗。
培訓(xùn)記錄表中缺少培訓(xùn)具體內(nèi)容和考核評(píng)價(jià)方法。
檢驗(yàn)室高壓蒸汽滅菌器操作人員無操作資格證書和相關(guān)培訓(xùn)記錄。
專職檢驗(yàn)員不具備所從事的微生物檢驗(yàn)的專業(yè)知識(shí)背景，在接受現(xiàn)場(chǎng)提問時(shí)無法完整回答微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目相關(guān)規(guī)定的內(nèi)容。
相關(guān)人員未定期接受體檢，或健康證已過期。
潔凈區(qū)壓差方面
在微生物限度室、陽性對(duì)照室與更衣室之間，更衣室與更鞋室之間，更鞋室與外界非潔凈區(qū)之間無指示壓差的裝置。
陽性對(duì)照室與緩沖走廊之間的壓差顯示為正壓。
無菌室與室外大氣的靜壓差小于10帕。
壓差表損壞，開關(guān)門無反應(yīng)。
文件記錄方面
未建立設(shè)備操作規(guī)程，操作規(guī)程未受控，現(xiàn)場(chǎng)存有已作廢文件。
未建立設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)制度或規(guī)程，無相關(guān)維護(hù)保養(yǎng)記錄。
記錄簽名不全，相關(guān)記錄上無手寫簽名。
檢驗(yàn)記錄造假。
記錄中信息缺失，無法滿足可追溯要求。
未提供原始檢驗(yàn)記錄。
記錄中所描述的過程參數(shù)與文件規(guī)定不一致。
未制定對(duì)菌種傳代、使用和保存的管理規(guī)定，未見菌種的傳代、使用和銷毀記錄。
微生物檢驗(yàn)用培養(yǎng)基無驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)及驗(yàn)收記錄。
未進(jìn)行清場(chǎng)，未能提供清場(chǎng)記錄。
設(shè)施設(shè)備方面
設(shè)施不足，如，未設(shè)置陽性對(duì)照室。
設(shè)備不足，如，微生物限度室中未設(shè)置對(duì)純化水進(jìn)行微生物限度檢測(cè)用的薄膜過濾設(shè)備。
未在潔凈區(qū)開展微生物檢驗(yàn)。
檢驗(yàn)設(shè)備未設(shè)置在檢驗(yàn)場(chǎng)所內(nèi)。
檢驗(yàn)場(chǎng)所環(huán)境條件不符合要求。
空氣凈化系統(tǒng)安裝位置不合理，不便于開展日常監(jiān)測(cè)及維護(hù)保養(yǎng)。
計(jì)量校驗(yàn)方面
未對(duì)檢驗(yàn)設(shè)備實(shí)施校準(zhǔn)或檢定。
校準(zhǔn)或檢定證書不在有效期內(nèi)。
初始污染菌控制方面
未根據(jù)產(chǎn)品質(zhì)量要求對(duì)產(chǎn)品的初始污染菌控制進(jìn)行規(guī)定。
未根據(jù)控制文件要求對(duì)產(chǎn)品的初始污染菌進(jìn)行檢測(cè)。
未對(duì)初始污染菌檢測(cè)記錄進(jìn)行匯總和趨勢(shì)分析。
未對(duì)初包裝材料的初始污染菌檢驗(yàn)作出規(guī)定并提供檢測(cè)記錄。
法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)符合性方面
檢測(cè)依據(jù)顯示為《中國藥典》2010版，而非現(xiàn)行、有效的《中國藥典》2015版。
文件規(guī)定中引用的標(biāo)準(zhǔn)與實(shí)際操作時(shí)遵循的標(biāo)準(zhǔn)不一致。
物料標(biāo)識(shí)方面
未對(duì)暫存物料的冰箱進(jìn)行有效的物料標(biāo)識(shí)管理，無法識(shí)別部分物料的名稱、配制狀態(tài)、檢驗(yàn)狀態(tài)；未對(duì)陽性菌種標(biāo)明傳代次數(shù)。
檢驗(yàn)用試劑的信息標(biāo)識(shí)不全，如，未對(duì)理化實(shí)驗(yàn)室中的部分化學(xué)試劑標(biāo)識(shí)其品名、濃度、配制時(shí)間等。
經(jīng)過進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)可發(fā)現(xiàn)，微生物檢驗(yàn)方面的常見共性缺陷項(xiàng)共36個(gè)。其中，文件記錄、人員、設(shè)施設(shè)備方面的共性缺陷在所有缺陷項(xiàng)中占比最高，分別約占27.8%、16.7%、16.7%。8個(gè)缺陷項(xiàng)類型的數(shù)量及所占比例情況按由高到低排列如表1所示。
通過以上分析可看出，微生物檢驗(yàn)的常見共性缺陷項(xiàng)分布較廣，涵蓋人員、設(shè)備、物料、法規(guī)等各方面。這也反映出，大部分生產(chǎn)企業(yè)中的相關(guān)從業(yè)人員對(duì)近年來發(fā)布的相關(guān)配套指導(dǎo)原則、指南及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，在理解和實(shí)施上存在不足，與應(yīng)達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)相比存在較大差距。
醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)（尤其是無菌醫(yī)療器械、植入性醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)）對(duì)如何按法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定、合規(guī)地開展微生物檢驗(yàn)，了解有待深入，在微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)、檢驗(yàn)人員培訓(xùn)、檢驗(yàn)記錄的準(zhǔn)備等方面存在不足，有必要接受相關(guān)專項(xiàng)培訓(xùn)并進(jìn)行整改。
03
微生物檢驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)檢查要點(diǎn)
監(jiān)管人員在進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢查時(shí)應(yīng)熟知每種檢驗(yàn)的具體要求，重點(diǎn)檢查培養(yǎng)基種類，主要檢驗(yàn)儀器，試劑的配制，以及對(duì)照試驗(yàn)、培養(yǎng)基適用性等。
筆者針對(duì)上述常見共性缺陷項(xiàng)，結(jié)合自身在醫(yī)療器械行業(yè)中的從業(yè)及監(jiān)管經(jīng)驗(yàn)，就醫(yī)療器械GMP現(xiàn)場(chǎng)檢查中的微生物檢驗(yàn)歸納出12條檢查要點(diǎn)（見表2），力求較全面地涵蓋現(xiàn)場(chǎng)檢查中監(jiān)管人員應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容，并為企業(yè)開展自查自糾提供切入點(diǎn)。
